TLX DNA-seq Kit的核心邏輯:全流程優(yōu)化的建庫(kù)解決方案
更新時(shí)間:2026-07-27 點(diǎn)擊次數(shù):14
DNA測(cè)序建庫(kù)的核心目標(biāo),是在最小化樣本損耗的前提下,獲得覆蓋均勻、無(wú)序列偏差、適配不同測(cè)序平臺(tái)的文庫(kù)分子,而TLX DNA-seq Kit正是圍繞這一目標(biāo),對(duì)建庫(kù)全鏈路的每個(gè)環(huán)節(jié)做了針對(duì)性設(shè)計(jì),其作用覆蓋從原始樣本到測(cè)序-ready文庫(kù)的全流程,原理則體現(xiàn)在對(duì)不同樣本類(lèi)型、不同建庫(kù)需求的精準(zhǔn)適配上。
TLX DNA-seq Kit第一個(gè)核心作用是完成原始樣本到建庫(kù)模板的高效轉(zhuǎn)化,對(duì)應(yīng)的原理是適配性的核酸捕獲體系。針對(duì)不同來(lái)源、不同質(zhì)量的核酸樣本,該Kit設(shè)計(jì)了差異化的純化方案:針對(duì)低豐度的循環(huán)腫瘤DNA、宏基因組環(huán)境樣本等微量核酸,通過(guò)優(yōu)化的磁珠結(jié)合體系和低損耗的轉(zhuǎn)移流程,大程度減少樣本在純化環(huán)節(jié)的損失,避免低豐度靶標(biāo)被遺漏;針對(duì)FFPE病理樣本、古DNA等降解類(lèi)樣本,采用了溫和的純化條件,優(yōu)先保留短片段核酸,避免長(zhǎng)片段核酸的非特異性吸附,保證降解樣本也能獲得足夠長(zhǎng)度的建庫(kù)模板,從源頭解決了不同樣本類(lèi)型的建庫(kù)適配難題。
第二個(gè)核心作用是將核酸精準(zhǔn)轉(zhuǎn)化為帶測(cè)序接頭的文庫(kù)分子,對(duì)應(yīng)的原理是低偏好的酶促反應(yīng)體系。建庫(kù)過(guò)程中的末端修復(fù)、A尾添加、接頭連接三個(gè)核心反應(yīng)環(huán)節(jié),傳統(tǒng)方法往往容易出現(xiàn)堿基偏好、接頭二聚體過(guò)多的問(wèn)題,該Kit采用了高保真的末端修復(fù)酶和連接酶,保證核酸末端的精準(zhǔn)修飾,避免堿基偏好;同時(shí)接頭采用了獨(dú)特的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),大幅降低了同源接頭的自連概率,針對(duì)微量樣本優(yōu)化了連接反應(yīng)的緩沖體系,提升了接頭連接效率,減少了后續(xù)PCR擴(kuò)增的循環(huán)數(shù),從反應(yīng)源頭降低了擴(kuò)增帶來(lái)的序列偏差。
第三個(gè)核心作用是輸出可直接上機(jī)的合格文庫(kù),對(duì)應(yīng)的原理是多梯度純化篩選體系。TLX DNA-seq Kit采用了兩步梯度純化的磁珠體系,可以根據(jù)目標(biāo)文庫(kù)的片段大小精準(zhǔn)篩選,有效去除反應(yīng)殘余、未連接的接頭、過(guò)短的降解片段等雜質(zhì),在減少有效文庫(kù)損失的同時(shí)保證文庫(kù)的純度,且純化后的文庫(kù)無(wú)需復(fù)雜的質(zhì)控調(diào)整,就能直接適配Illumina、華大智造等主流測(cè)序平臺(tái)的上機(jī)要求,大幅簡(jiǎn)化了建庫(kù)后的處理流程。整體來(lái)看,該Kit的作用是整合了傳統(tǒng)建庫(kù)的多步操作,通過(guò)全流程的試劑和條件優(yōu)化,解決了不同樣本建庫(kù)的痛點(diǎn),最終實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定、高效、低偏差的建庫(kù)效果。
